选购荧光酶标仪的七点注意详解

更新时间：2023-09-20

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基于荧光的检测方法在生命科学研究中应用广泛。市面上有多种试剂盒和试剂可用于荧光酶标仪所涵盖的各种检测类型。

常见荧光检测应用包括DNA/RNA定量、钙测定、酶活性、基因表达、GPCR的第二信使信号、细胞凋亡测定、细胞增殖、转染效率、细胞毒性等。

如果您正在选购一台荧光酶标仪，各种规格、选项和功能也许会让您挑花了眼。为此，我们总结了7个最重要的关注点，让我们为您一一道来。

1/灵敏度

毋庸置疑，灵敏度更高的酶标仪能够提供更好的数据和统计结果，重复样本之间的差异更小，有反应和无反应样本之间的距离（assay window）更大。更高的灵敏度还有助于减少试剂和样品的用量，使检测更加精简的同时，生成高质量的结果。这将有效降低每个样品的检测成本

2/动态范围

在荧光强度检测中，样品的浓度范围通常较大。在荧光酶标仪上测量的信号可能会跨越从极弱到强的范围。还有，基于酶或细胞动力学检测的样品通常很难预测其信号强度，因为在动力学检测过程中，最大信号会随着时间而累积。

在这些情况下，可能很难在一次测量中用一种设置获取所有样品的信号。信号强度高的样品可能会使酶标仪的荧光检测器饱和；信号强度低的样品可能无法与空白样品区分开来。

如果荧光酶标仪支持较大的动态范围，可在单次运行中读取差异很大的样品，避免试出正确的稀释倍数和荧光增益比率所造成的试剂和时间浪费。BMG LABTECH的 CLARIOstar® Plus和VANTAstar® 酶标仪配备的动态范围扩展技术(EDR)提供具有竞争力的动态范围（8个数量级浓度），可在单次运行中自动测量极弱和强的信号，无需进行调节。

3/波长选择

激发和发射波长是任何荧光检测的必要参数。选择合适的波长可降低通常由样品和微孔板的光散射或自发荧光引起的非特异性背景或干扰。

4/兼容的微孔板规格

在生命科学研究中，进行基础的荧光测定一般使用黑色96孔微孔板。但如果您有多种样品，并希望节约宝贵的试剂或时间，也可以使用384孔和1536孔板。只需确保您选择的荧光酶标仪也能兼容您计划使用的微孔板规格。还有一点，吸光、荧光和化学发光检测需要不同颜色的微孔板，分别为透明、黑色和白色

5/试剂注入装置

在选购荧光酶标仪时，还应考虑分析应用的性质。对于酶动力学检测或基于细胞实时反应的检测，试剂注入器能派上大用场。手动将试剂移入孔中有可能导致反应的重要数据丢失。特别是对于一些快速反应，可能还没来得及检测，您所寻找的信号就已经消失了。我们的荧光酶标仪配备了试剂注入器，注射和信号检测同时在一个孔中进行，然后在下一个孔继续进行（图 5）。这样一来，即使是快速反应，您也不会错过任何数据点。

6/环境控制

如果您需要进行基于活细胞的测定，又想避免在荧光酶标仪和培养箱之间来回移动微孔板，请确保您选择的酶标仪具有控制其内部气体环境和温度的功能。

BMG LABTECH酶标仪可集成大气控制单元（ACU，图 6）。ACU可独立调节酶标仪仓内的氧气和二氧化碳含量，为活细胞检测应用提供理想的环境。与振荡和恒温孵育功能相结合，ACU为基于细胞的检测（从标准细胞生长到缺氧检测等）提供了真正不用操心的“甩手"解决方案。

7/数据分析软件

酶标仪的软件是容易被低估的选购要点。有些酶标仪软件只能控制测定过程并提供原始检测数据输出，也有些软件可以进行复杂的分析。

一款全面、易用、灵活的软件是您的得力助手，可简化检测和数据分析过程，使仪器发挥应有的作用。

荧光检测中的计算功能包括自动扣除空白，以及根据标准曲线自动计算浓度、Km和Vmax等酶常数。

对于常见的测定应用，BMG LABTECH软件包提供预设的快速测定专用方案和专用分析模板。通过这些专用解决方案，只需单击鼠标即可采集和分析数据，使研究人员能够快速、轻松地进行实验（图 7）。