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美国corning(康宁)细胞计数仪常见问题

更新时间:2023-05-27      浏览次数:287

康宁细胞计数仪(货号为6749)可计数的细胞大小和浓度范围是多少?
可计数的细胞大小范围为4~70 μm,细胞浓度范围为5 x 104~1.0 x 107细胞/mL。

康宁细胞计数仪能否对活细胞和死细胞进行区分?
可以。通过细胞悬液与台盼蓝1:1混合,台盼蓝会将死细胞染成深蓝色,而活细胞则不被台盼蓝染色。将混合液加入计数板中计数时,在软件页面选择“trypanblue, yes (1:1)", 计数仪会自动分析死活细胞的数量及比例,并将结果直接展示在结果区,该结果无需再乘以2。

康宁细胞计数仪能否对细胞团簇进行区分并准确计数?
可以分析含有细胞簇的样品。以下是对于293T细胞计数的测试图片供您参考,两图中红圈圈出部分是细胞团簇,右图中绿点代表检测到的活细胞,红点代表识别的死细胞。


计数时,视野中心细胞清晰,而边缘细胞对焦不清晰,尤其是小于10um的细胞,是否会影响计数结果?
由于计数仪镜头是球形的,在对焦准确时,即使边缘的对焦不是很清晰,仪器仍然会对视野中计数范围内(4-70 μm)的细胞进行计数。若您对计数结果的准确性有较高的要求,建议您拍摄多张图片进行计数,软件可以将多张图片中的结果整合取平均数,以提高计数准确性。

如何更好地对焦, 从而确保计数准确?
为了准确地计数分析,需要确保对焦准确。通过聚焦旋钮多次顺时针或逆时针旋转,并且可以进一步放大图像观察,能够看到活细胞有明亮的中心和清晰的边缘,如下图所示,左侧图为未成功对焦,而右侧图中对焦准确:


 

康宁细胞计数仪能否对外周血单核细胞(PBMC)进行计数?
可以。PBMC细胞大小约7-8 μm,符合康宁细胞计数仪的计数范围。在对PBMC计数时,需要注意避免碎片等非细胞杂质被识别成死细胞从而影响结果,因此准确对焦非常重要。死细胞在对准焦后呈现出实心黑点的样子,如下图所示,尽可能避免对焦后有光环或模糊状的存在。

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