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PCR技术的发展及其与离心机​的关联

更新时间:2023-05-11      浏览次数:352
PCR技术与离心机的关系可以说是密不可分。


从20世纪80年代中期开始,聚合酶链反应(Polym erase Chain Reac tion,PCR)发展起来的体外核酸扩增技术。

因为优点众多又突出,比如特异﹑敏感、产率高﹑快速﹑简便、重复性好、易自动化等,所以那时候被称为医学生物领域的一项革命性创举和里程碑。

查阅相关资料获悉人类对核酸的研究有100多年的历史了,从20世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术。

K orana于1971年最早提出核酸体外扩增的设想,该设想在1985年被Mullis等人实现。他们发明了具有划时代意义的聚合酶链反应。其原理类似于DNA的体内复制,只是在试管中给 DNA的体外合成提供了合适的条件:模板DNA,寡核苷酸引物, DNA聚合酶,合适的缓冲体系,DNA变性、复性及延伸的温度与时间等。

但Mullis最初使用的DNA聚合酶是Klenw酶,它不耐高温,90℃时会变性失活,每次循环都要重新添加同时其体外扩增的保真性较差,使得 PCR技术在一段时间内没能引起生物医学界的足够重视。直到1988年,Saiki等人从嗜热杆菌( hem us aquaticus)中提取到一种耐热DNA聚合酶(此酶被命名为TaqDNA多聚酶)才使得PCR技术得以广泛应用。

PCR技术模拟DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物,该原理主要包括3个基本反应过程:变性一---退火—一--延伸。变性主要是指双链 DNA的变性,即双链 DNA经加热至93℃左右,其热稳定性降低,配对碱基之间的氢键断裂,使双链DNA成为单链,以便与引物结合。退火是指单链 DNA在温度降低时与引物的复性(称为退火)。在此过程中,引物与单链 DNA模板仍然按照碱基互补的方式配对。延伸是指引物与DNA模板按碱基互补的原则配对后,在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,进行体外的半保留复制,合成一条新的与模板DNA链互补的新链。

经重复循环变性—-退火-—--延伸3个过程,就可获得更多的“半保留复制链"而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一次循环需2~4 m in 2~3 h就能将目的基因扩增、放大几百万倍。

由此可见PCR技术相当复杂,人们除了推进实验技术,还在想法设法的始得实验技术更成熟,那么如何才能实现,答案是借助仪器,每一项实验需要的实验仪器需要更精确更适合这样才能更进一步的提升实验效率。

比如核酸检测就需要用到核酸检测离心机。

通过专业离心机厂家上海卢湘仪离心机仪器有限公司我们可以了解到:

核酸检测是在PCR实验室进行,核酸是生物体内的高分子化合物,包括脱氧核糖核酸DNA和核糖核酸RNA两大类,广泛存在于所有动植物、微生物及生物体内。核酸是基本的遗传物质,在生长、遗传、变异等一系列重大生命现象中起决定性的作用。通过核酸检测离心机的检测,对肿瘤的发生,病毒的感染以及射线对人体的影响等都有重要的临床意义。


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