电泳实验的危害与防护注意事项

1.DNA电泳与溴化乙锭

“DNA的琼脂糖凝胶电泳”是生物化学实验的基础型实验。“质粒DNA的分离、纯化和鉴定”在很多学校也是必开的综合性实验。这些涉及到DNA的提纯及鉴定的实验都会用到高度灵敏的荧光染色剂溴化乙锭对DNA进行染色。EB是强诱变剂，具有高致癌性，会在60～70 cc蒸发，所以在学生实验中要特别注意其安全使用，严禁随便丢弃。在实验中使用及实验结束后处理应注意以下事项。

1.1 使用中注意事项

 实验室涉及到EB的操作应统一固定在实验室的某一角落，称量固体时要带面罩和手套，使用含有EB的溶液务必带上手套。同时不要在胶太热的时候加EB，以防止因蒸发被吸入。接触到EB的玻璃器皿应集中放置并专门使用，污染到EB的枪头、抹布、手套及EB染色跑完的胶，回收至棕色的玻璃瓶中，定期进行焚烧处理旧。桌面或物体表面污染到EB时，可用活性碳进行处理。

 1.2  废EB溶液处理
 (1)EB浓溶液（浓度大于0.5 mg/mI）的净化处理
先将EB溶液用水稀释至浓度低于0.5 mg/mI，加人1倍体积的5％次高锰酸钾，小心混匀后再加1倍体积的2.5 moL/L盐酸。小心混匀，于室温放置数小时；加入l倍体积的2.5 mol/L氢氧化钠，小心混匀后可丢弃该溶液，统一处理。

 (2)EB稀溶液(浓度小于0.5 mg/mI)的净化处理按1 mg/mL的量加入活性炭，不时轻摇混匀，室温放置1 h；用滤纸过滤溶液，丢弃滤液并将活性碳与滤纸密封后丢弃，统一处理。

2. 聚丙烯酰胺凝胶电泳与有毒、有害物质

聚丙烯酰胺凝胶电泳在生物化学实验中是常用的实验手段，涉及到蛋白质分离纯化及鉴定、蛋白质分子量及等电点测定的实验都会使用到该电泳方法，如“聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质”、“SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的相对分子量”、“聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦法测定蛋白质等电点”等基础实验。在聚丙烯酰胺凝胶制备过程中用到以下有毒、有害物质：

2.1   丙烯酰胺
 丙烯酰胺具有很强的神经毒性，同时还有生殖、发育毒性。神经毒性作用表现为周围神经退行性变化和脑中涉及学习、记忆和其他认知功能部位的退行性变化。实验还显示丙烯酰胺是一种可能致癌物。丙烯酰胺可通过皮肤吸收及呼吸道进入人体，且累积毒性，不容易排毒。因此，称量固体丙烯酰胺粉末和处理它们的溶液时必须戴手套和口罩。当丙烯酰胺聚合为聚丙烯酰胺凝胶时则为无毒的，但操作时仍要小心，凝胶内可能有少量未聚合的丙烯酰胺。

2.2  甲叉双丙烯酰胺
 甲叉双丙烯酰胺是丙烯酰胺形成凝胶的交联剂，因有取代基丙烯酰胺，因此具有一定的毒性，能轻微刺激眼睛、皮肤和粘膜。称量固体粉末和处理它们的溶液时需戴手套和口罩，应避免与人体长时间直接接触，误碰触时应用清水洗净。

2.3  TEMED
 TEMED是形成凝胶反应所用的加速剂，也具有强神经毒性，应防止误吸，操作时快速，存放时密封。

2.4  过硫酸铵
 过硫酸铵是丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺进行化学聚合的引发剂，对黏膜和上呼吸道组织、眼睛和皮肤有极大危害性。吸人可致命。操作时需戴合适的手套、安全眼镜和面罩，始终在通风橱里操作，操作完后*洗手。

2.5  十二烷基硫酸钠(SDS)
 SDS是·种阴离子表面活性剂，与蛋白形成复合物，用于测定蛋白质分子量。SDS有毒，是一种刺激物，能对眼睛造成严重损伤，可因吸入、咽下或皮肤吸收而损害健康。称量及配溶液时不要吸人其粉末，需戴合适的手套、面罩和护目镜。

2.6  巯基乙醇
 它在测定蛋白质分子量时用于处理样品，吸入、摄人或经皮肤吸收后会中毒。其中毒表现有紫绀、呕吐、震颤、头痛、惊厥、昏迷，甚至死亡；对眼、皮肤有强烈刺激性；对环境有危害；对水体可造成污染。应在通风橱里操作，佩戴面罩，戴乳胶手套。

3.  RNA提取与有毒、有害溶剂

“动物肝脏RNA的制备和纯度测定”是生物化学实验课中必开的基础实验，RNA的提取过程需要用到溶剂去除蛋白质，这些溶剂对人体具有一定的毒性。